La propagación de plántulas, se presenta en la naturaleza mediante procesos fisiológicos, que permiten a un nuevo organismo, en este caso vegetal, desarrollarse de forma completa e independiente, a partir de características morfoanatómicas y genéticas de la planta progenitora, sin embargo, amigos de STEEMIT, la reproducción y propagación natural en las plantas, arrastra implícitamente ciertas desventajas desde lo hereditario, entre ellas, la manifestación susceptible a desarrollar las mismas enfermedades, de allí la importancia de las herramientas Bio-Tecnológicas como la Organogénesis in vitro, que permite multiplicar material vegetal obteniéndose plántulas sanas y genéticamente homogéneas.

RESUMEN

El presente post tiene por objetivo, socializar información respecto la importancia de las técnicas Bio-Tecnológicas en la propagación de plántulas sanas, para lograr este acometido se presenta un ejercicio práctico a nivel de laboratorio, sobre la regeneración de plántulas por organogénesis in vitro a partir de explantes de papa Solanum tuberosum, usando varios reguladores del crecimiento en 4 medios de cultivo, a) 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) , b) MS, c) Kin (Kinetina) y d) IBA-BA (ácido indol-butirico + benciladenina) . Los resultados obtenidos indican, que en el tratamiento que contenía 2,4-D se formaron callos de color crema, en los medios MS y Kin se observaron explantes con un crecimiento apreciable en tallos y raíces, además encontraron los mejores valores de crecimiento en IBA-BA, donde se registró la mayor formación de plántulas, multiplicación radicular por organogénesis y mayores puntos de crecimiento.

Palabras claves: Organogénesis, in vitro, técnicas Bio-Tecnológicas, explantes, Solanum tuberosum.

ABSTRACT

The objective of this post is to disseminate information regarding the importance of Bio-Technological techniques in the propagation of healthy seedlings. To achieve this goal, a practical laboratory-based exercise on the regeneration of seedlings by in vitro organogenesis is presented. of potato explants Solanum tuberosum, using several growth regulators in 4 culture media, a) 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) , b) MS, c) Kin (Kinetin) and d) IBA-BA (indole-butyric acid + benzyladenine). The obtained results indicate that cream-colored calli were formed in the treatment containing 2,4-D, explants with appreciable growth in stems and roots were observed in the MS and Kin media, and they also found the best growth values in IBA. -BA, where the greatest formation of seedlings was registered, root multiplication by organogenesis and higher growth points.

Key words: Organogenesis, in vitro, Bio-Technological techniques, explants, Solanum tuberosum.

Elementos conceptuales:

La regeneración de plantas a partir de cultivos de tejidos puede realizarse por vías como la organogénesis y embriogénesis. En el caso de la organogénesis técnica in vitro que conduce a la diferenciación de meristemos apicales (caulinares y radiculares) es una de las herramientas más utilizadas para el desarrollo de plántulas sanas. Sin embargo, la inducción por organogénesis in vitro depende de múltiples factores, dentro de estos la composición y concentración de los reguladores del crecimiento en el medio de cultivo, son factores determinantes para la regeneración de plantas en los sistemas de cultivo de tejidos.

Ejemplo práctico:

En la constante búsqueda, de hacer comprensible la temática publicada, les presentaré un ejemplo a nivel de laboratorio, con la finalidad evaluar la capacidad que tienen diferentes medios de cultivos para lograr la regeneración de plántulas por organogénesis in vitro, a partir de explantes de papa Solanum tuberosum., actividad ejecutada en el Laboratorio de Investigaciones Genéticas del Decanato de Postgrado de la Universidad Nacional Experimental del Táchira (UNET), San Cristóbal, Venezuela.

PROCEDIMIENTO METODOLÓGICO:

Material vegetal.

Como material de partida, se trabajó con explantes de papa (Solanum tuberosum), previamente obtenidos in vitro en el laboratorio de Cultivo de Tejidos de la UNET.

Establecimiento in vitro.

En condiciones asépticas, se realizaron cortes de 2 mm a los tallos mejor desarrollados, se garantizó que cada corte presentara 2 entrenudos, luego se procedió a sembrar en los siguientes medios de cultivos; a) 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético), b) MS, c) Kin (Kinetina) y d) IBA-BA (ácido indol-butirico + benciladenina).

Tratamientos evaluados.

Los tratamientos evaluados, consistieron en un (01) frasco de cultivo por 4 explantes para cada medio de cultivo, los frascos se colocaron en una cámara de incubación bajo condiciones de luz artificial, realizando observaciones cada 8 días por 4 semanas, con el objeto de describir los cambios morfológicos que se generaron en cada tratamiento.

RESULTADOS OBTENIDOS:

Influencia de los medios de cultivos en la multiplicación in vitro de papa:

En el frasco que contenía 2,4-D, se formaron callos de color crema y se observaron pequeños puntos de crecimiento en los explantes, los cuales fueron más visibles en la semana número 4, resultados similares se han encontrado en varios cultivos, esto se debe a que el Acido 2,4-diclorofenoxiacético propicia una desorganización celular, que conforma una masa que recibe el nombre de callo.

Figura 1. Características morfológicas de callos y plántulas de papa Solanum tuberosum, regeneradas en A. En el medio 2,4-D (Lado Izquierdo) y B. En el medio MS (Lado Derecho). Autor de la imagen: @lupafilotaxia.

En el medio de cultivo MS, se logró observar un crecimiento apreciable de tallos y raíces, similar comportamiento se encontró en el tratamiento con Kin, debido posiblemente a la concentración de esta citocinina.

Figura 2. Características morfológicas de callos y plántulas de papa Solanum tuberosum, regeneradas en C. En el medio Kin (Lado Izquierdo) y D. En el medio IBA-BA (Lado Derecho). Autor de la imagen: @lupafilotaxia.

El mejor medio, para inducir mayor formación de plántulas y multiplicación radicular por organogénesis fue el tratamiento que contenía IBA-BA. En este medio de cultivo también se obtuvo el mayor número de puntos de crecimientos, respecto al resto de los tratamientos evaluados. Este efecto posiblemente se deba al estímulo que ejercieron el ácido indol-butirico (auxina) y la benciladenina (citocinina) sobre la división y elongación de las células que participan activamente en el crecimiento y desarrollo radicular.

Consideraciones finales:

Los resultados obtenidos demuestran que el cultivo de tejidos vegetales, mediante la herramienta Bio-Tecnológica Organogénesis in vitro, permite multiplicar de forma vegetativa plantas de papa, logrando la formación de callos, formación y crecimiento de plántulas sanas y genéticamente homogéneas, además de la multiplicación radicular a partir de explantes de papa Solanum tuberosum.

GLOSARIO DE TÉRMINOS:

Auxina: Se refiere a la fitohormona, encargada de regular el crecimiento de las plantas, mediante el proceso de elongación.

Citocinina: Grupo de fitohormonas, que intervienen fisiológicamente promoviendo la división y especialización celular.

Explantes: En biotecnología vegetal, un explante, es el tejido o conjunto de células vivas, que se encuentran fuera de su órgano de origen, transferidas a un medio no natural de crecimiento.

in vitro: Se refiere a la herramienta bio-tecnológica, donde se desarrolla un experimento, en condiciones de laboratorio mediante un tubo de ensayo.

Medio de cultivo: Herramienta bio-tecnológica, que posee un gel o una solución, contentiva de los nutrientes necesarios e indispensables para el crecimiento y desarrollo, de organismos bien sea animal u vegetal.

Morfoanatómico: Se refiere a las características de morfológicas y anatómicas, que identifican a un organismo a nivel estructural.

Organogénesis: Dícese de los cambios morfoanátomicos, que da como resultados la formación de un órgano.

Plántulas: Dícese del estado de desarrollo fisiológico, del nuevo esporófito u organismo vegetal.

Propagación: Acción de propagar, en materia vegetal conjunto de reacciones fisiológicas a nivel celular, que permiten la multiplicación vegetativa.

Reguladores del crecimiento: Son sustancias, cuya acción fisiológica permite el crecimiento y desarrollo de las plantas.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS CONSULTADAS:

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Organogénesis in vitro: Una alternativa Bio-Tecnológica para la propagación de plántulas sanas y genéticamente homogéneas.